Pruebas moleculares para Diabetes Mellitus

Microarrays de ADN han proporcionado a los investigadores médicos con una poderosa herramienta para estudiar los mecanismos de las enfermedades complejas, como la obesidad y la diabetes tipo 2 (DT2). 

Perfiles de expresión génica son la principal aplicación de microarrays de ADN hasta ahora. La grasa subcutánea, grasa visceral, adipocitos y preadipocitos, músculo, hígado, páncreas y núcleos específicos en el hipotálamo en condiciones normales y de enfermedad se utilizan en el tratamiento del perfil de expresión de genes en la obesidad y T2D. En esta revisión, la aplicación de microarrays para dilucidar el papel de la proteína de unión a retinol 4 como un vínculo entre la obesidad y la DM2.

Referencias: 

IACSIT. [Internet]: International Journal of Engineering and Technology; Vol.3, No.3, [actualizado June 2011; citado 26 May 2017]. Disponible en: http://www.ijetch.org/papers/243-T686.pdf

Pueba de PCR en Diabetes Mellitus (Tipo 2)

Tema: Estudio génico (OPG, RANKL, Runx2 y receptores AGE) en cultivos de osteoblastos humanos de pacientes con diabetes mellitus tipo 2 y fractura de cadera. Influencia de los niveles de glucosa y AGEs.

Objetivo: Valorar si las variaciones de glucosa circulante generan alteraciones en la expresión de genes relacionados con la diferenciación y actividad osteoblástica (OPG, RANKL, Runx2 y AGER) en el cultivo primario de osteoblastos (hOB).

Muestra: Cultivos primarios de osteoblastos humanos (hOB) a partir de hueso trabecular.

Tipo de ácido nucleico:    ARNm genómico                                   

Extracción de ADN:

                                          Lisis: Kit High Pure RNA Isolation

                                          Separación: Kit High Pure RNA Isolation

                                          Purificación: Kit High Pure RNA Isolation

                                          Gen a amplificar: OPG, RANKL, Runx2 y AGER

Tipo de PCR:                   PCR en tiempo real

Pasos:                              Desnaturalización

                                         Hibridación

                                         Elongación

Visualización:                  EFO

Referencias: 

Díaz M. Unidad de Osteoporosis.U.G.C de Medicina Interna –Universidad de Sevilla. [Internet] 2011; [citado 21 Mayo 2017]. Disponible en: http://www.revistadeosteoporosisymetabolismomineral.com/pdf/articulos/12012040100070014.pdf

Pruebas de tamizaje y confirmatorias para diabetes

Pruebas de tamizaje:

•  Prueba de glucemia basal
•  Medición de la glucemia postprandial

La glucosa en ayunas es la prueba más sencilla para realizar tamizaje de Diabetes Mellitus en personas asintomáticas. La prueba para el tamizaje de diabetes es la medición de la glucemia 2 horas post carga de glucosa. Una prueba de tamizaje solo indica una alta probabilidad de tener DM y debe ser confirmada con una prueba diagnóstica.

 

Pruebas confirmatorias:

·      Glucosa sanguínea en ayuno (PGA).

·      Tolerancia Oral a la Glucosa (PTOG).

·      Glucosa sanguínea a cualquier hora del día.

El diagnóstico de diabetes se confirma mediante las pruebas de glucosa sanguínea en ayuno y la tolerancia oral a la glucosa que son utilizadas para diagnosticar diabetes o pre-diabetes y la prueba de glucosa sanguínea a cualquier hora del día, es utilizada para el diagnóstico de diabetes, pero no de pre-diabetes.Los síntomas como poliuria, polifagia, polidipsia, pérdida de peso conllevan a la sospecha clínica de la diabetes. 

Referencias: 

Becton Drive. Diagnóstico de la diabetes [Internet]. 2016; [citado 14 Mayo 2017]. Disponible en: http://www.bd.com/mexico/diabetes/main.aspx?cat=3258&id=3279

American Diabetes Association. Standards of Medical Care in Diabetes. [Internet] 2017; [citado 14 Mayo 2017]. Disponible en: http://care.diabetesjournals.org/content/39/Supplement_1/S4

 Mejía. R. Salud y Medicinas-Exámenes para detectar diabetes, [Internet] 2017; [citado 14 Mayo 2017]. Disponible en: http://www.saludymedicinas.com.mx/centros-de-salud/diabetes/analisis-y-estudios-de-laboratorio/examenes-para-detectar-diabetes-invaluable-ayuda.html

Alteraciones de la epigenética

Epigenética de la Diabetes 

La hiperglucemia activa mecanismos epigenéticos responsables del desarrollo de las complicaciones de la diabetes. Picos de hiperglucemia en diabetes mal controlada, en combinación con el trasfondo genético del individuo (presencia de mutaciones o polimorfismos), desencadena cambios en la expresión de microácidos ribonucleicos y la activación de factores de transcripción proinflamatorios (NFKB o TGFB) que producen cambios transitorios en la estructura de la cromatina de sus genes diana en diferentes tejidos, estableciendo un patrón de expresión génica patológico. Al mismo tiempo, la hiperglucemia y los cambios en los metabolitos causados por esta afectan a la función de enzimas y cofactores epigenéticos que pueden estabilizar el patrón de expresión génica anómalo. Este patrón alterado puede así mantenerse en el tiempo incluso tras la retirada del estímulo (memoria metabólica), influyendo en el desarrollo de las complicaciones de la diabetes.

Referencias:

Lu C, Thompson CB. Metabolic regulation of epigenetics. Cell Metab [Internet]. 2016; [citado 06 Mayo 2017].Disponible en: http://diabetespractica.com/docs/publicaciones/146348498503_articulo_revision_7-1.pdf

Valladares-Salgado A. Epigenética de la obesidad infantil y diabetes [Internet]. 2013; [citado 06 Mayo 2017].Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2014/ims141o.pdf